期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
链亲和素-补体3d(SA-C3d)融合蛋白的制备及其功能检测
童玲；左安欣；牛婷婷；周世荣；高基民
关键词：链亲和素-补体3d(SA-C3d), 包涵体, 原核表达, MB49细胞
摘要：目的 原核表达链亲和素-补体3d(SA-C3d)融合蛋白,体外探索蛋白活性.方法 以C3 cDNA为模板扩增出C3d段DNA,使用一步克隆法将C3d段与酶切后的质粒pET-24a-6His-SA-IL15相连,获得SA-C3d原核表达质粒.将测序正确的质粒转化入表达感受态大肠杆菌Rosetta中,诱导蛋白表达.使用镍柱亲和层析及梯度逐级减低的变性剂脲素透析复性的方法获得目的蛋白.通过锚定生物素化的MB49细胞实验反映SA的功能,通过促进Raji细胞生长的实验检测C3d的功能.结果 成功构建SA-C3d原核表达质粒,通过镍柱纯化与透析复性获得高纯度目的蛋白.该蛋白特异性的与生物素化的MB49细胞结合,促进Raji细胞增殖并呈现剂量依赖效应,体现蛋白SA-C3d具有双功能活性.结论 成功制备的SA-C3d融合蛋白可在体外与生物素化的MB49细胞结合并促进Raji细胞增殖.
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