期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
成年小鼠心脏成纤维细胞的分离、纯化和原代培养
李如君；龚开政；张振刚
关键词：成年小鼠, 心脏成纤维细胞, 原代培养, 细胞鉴定
摘要：目的 探讨并建立成年小鼠心脏成纤维细胞原代培养方法.方法 采用0.8 g/LⅣ型胶原蛋白酶和1 g/L胰蛋白酶为消化液,以多次短时间水浴振荡的方式消化成年小鼠心脏组织,差速贴壁法分离纯化心脏成纤维细胞.波形蛋白免疫荧光细胞化学染色法鉴定细胞类型及纯度;倒置相差显微镜观察细胞生长情况,绘制细胞生长曲线;CCK-8法测定细胞增殖能力、Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后细胞SMAD家族成员2/3(Smad2/3)蛋白及磷酸化水平.结果 差速贴壁后在相差显微镜下可见大量球形贴壁细胞;3d后细胞逐渐由圆形伸展为长梭形并迅速增殖,分裂象多见;5d后细胞数量显著增多,完全汇合无空隙;细胞生长曲线近似“S”形.波形蛋白阳性率可达95％.CCK-8法显示在第3～5天细胞增殖能力显著,给予第2代心脏成纤维细胞TGF-β1刺激显示Smad2/3蛋白磷酸化水平明显增加.结论 建立了一种快速、经济、有效获取成年小鼠心脏成纤维细胞的方法.
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