期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
H1N1型流感病毒小鼠杂交瘤单克隆抗体的制备和鉴定
刘杨；赵向绒；郭春艳；李研；王光华；梁导艳；余鹏博；李元；胡军
关键词：流感病毒, 单克隆抗体, 血凝素, 病毒感染
摘要：目的 纯化H1N1流感病毒作为抗原免疫小鼠制备单克隆抗体(mAb),并以mAb为工具分析病毒对宿主细胞的感染情况.方法 鸡胚培养A/PR/8 (H1N1),收获尿囊液,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,透射电镜鉴定病毒颗粒,甲醛灭活病毒后免疫小鼠,评价抗原免疫效果,取鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合制备mAb.用ELISA、免疫荧光细胞化学染色、Western blot法、血凝抑制试验和微量中和试验对mAb特性进行鉴定.依据流式细胞术用血凝素mAb分析流感病毒感染MDCK细胞后血凝素蛋白在宿主细胞膜上展示特征和病毒感染对细胞凋亡的影响.利用血凝素mAb建立基于细胞的ELISA(Cell-based ELISA)并对病毒增殖和感染动态进行分析.结果 纯化出的A/PR/8病毒在电镜下呈圆形、椭圆形和棒状,免疫小鼠血清中流感病毒IgG滴度动态增长,免疫6周后IgG滴度达106.免疫小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合制备出6株流感病毒mAb,其中PR8-10 mAb血凝抑制活性和中和活性均高,分别为1:2048和1:640.免疫荧光细胞化学染色和Western blot结果表明该mAb可与血凝素结合.流式细胞术显示PR8-10也可识别细胞膜上的血凝素,同时发现病毒感染细胞后会引起细胞凋亡.依据PR8-10可识别细胞膜上的血凝素原理建立的Cell-based ELISA可分析病毒增殖情况.结论 纯化出完整病毒颗粒免疫小鼠可刺激产生抗病毒IgG,并制备出高亲和活性和中和活性的H1N1病毒mAb,该mAb可分析病毒感染特征以及病毒对细胞的影响.
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