期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
响应面优化多细胞因子联合诱导分离树突状细胞的工艺
段训威；肖桂清；赵艳兰；王礼兴；郑晨娜；董乐；吴文林
关键词：未成熟树突状细胞, 成熟树突状细胞, Box-Behnken设计, 响应面法
摘要：目的 优化多细胞因子联合诱导分离树突状细胞(DC)工艺,提高小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)体外诱导分离效率.方法 采用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)、重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)、脂多糖(LPS)、重组小鼠肿瘤坏死因子α(rmTNF-α)和诱导时间为考察因素,未成熟树突状细胞(imDC)和成熟树突状细胞(mDC)获得量为考察指标,采用Box-Behnken设计试验,响应面法分析并验证试验结果,并结合光学显微镜、电子显微镜、流式细胞术分析BMDC形态、表面标志物等指标.结果 响应面优化诱导imDC佳诱导工艺rmGM-CSF为46 ng/mL、rmIL-4为24ng/mL,诱导时间为6 d;imDC获取量为(4.58±0.28)×106个,相对偏差为4.00％.诱导mDC佳工艺LPS为1.4 μg/mL、rmTNF-α为30ng/mL,诱导时间为1 d;mDC获取量为(4.21 ±0.15) ×106个,相对偏差为3.80％.体外诱导5～7 d,可获得足量的具有典型树突状的DC,流式细胞术检测发现imDC较高表达CD11c(68.62％ ±2.3％),低表达CD86 (37.95％±1.8％);mDC高表达CD11c(82.05％±1.6％)和CD86(90.34％±1.4％).结论 单因素实验与响应面优化联合优化多细胞因子体外快速、高效诱导扩增DC,为进一步研究提供了工具.
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