期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人神经菌毛素1的b1b2结构域(HuNRP1b)蛋白单克隆抗体的制备
戴华；张海霞；王美玲；葛凡；沈颖
关键词：人神经菌毛素1 b1b2结构域(HuNRP1b), 单克隆抗体
摘要：目的 制备人神经菌毛素1的b1b2结构域(HuNRP1b)蛋白,研制抗HuNRP1b单克隆抗体(mAb).方法 将HuNRP1 b的编码基因克隆入pET22b载体,构建重组表达质粒pET-HuNRP1b,经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌并进行诱导表达,SDS-PAGE分析重组HuNRP1 b蛋白(rHuNRP1 b,His-HuNRP1 b)的表达.将获得的His-HuNRP1 b免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,以融合表达可溶性标签“触发因子”(TF)的重组蛋白TF-HuNRP1 b建立检测抗HuNRP1bmAb的间接ELISA,筛选阳性杂交瘤细胞株;以ELISA、Western blot法分析mAb的特异性,以间接免疫荧光法(IFA)鉴别mAb识别天然蛋白的能力.结果 His-HuNRP1b得到成功表达;获得2株稳定分泌抗HuNRP1bmAb的细胞株(1A10、6A2).Western blot结果显示mAb与表达rHuNRP1b的重组菌反应,分别在相对分子质量(Mr)34 000(His-HuNRP1b)及Mr89 000 (TF-HuNRP1b)处出现特异性条带,而与空载体表达菌不反应,说明mAb特异性针对rHuNRP1b;IFA结果表明,所获得的mAb能够识别乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞表面表达的天然HuNRP1蛋白,说明mAb具有识别天然的HuNRP1的能力.结论 成功制备了小鼠抗HuNRP1b mAb.
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