期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
NK92细胞经非溶酶体途径快速生成并释放35 kD颗粒酶B至靶细胞
汪蕾；江绍伟；肖凌；陈琳；李安政；郑芳
关键词：颗粒酶B, NK92细胞, 分泌型溶酶体, 细胞凋亡
摘要：目的 探讨NK92细胞能否经非分泌型溶酶体途径分泌颗粒酶B(GZB)以及其可能的分泌机制.方法 NK92细胞作为细胞模型,经佛波酯(PMA)和离子霉素(ION)活化后4h内,采用免疫荧光染色和胶体金标记免疫电镜技术检测NK92细胞胞质中蛋白合成功能被抑制前后相对分子质量(Mr)35 000和32 000 GZB的含量及其分布情况;采用Westem blot法检测分离纯化分泌型溶酶体(SL)及不含溶酶体胞质中的GZB种类;通过EDTA抑制溶酶体的胞吐来阻断Mr32 000 GZB的释放,观察活化后NK92细胞上清中的Mr35 000 GZB含量;将活化的NK92细胞与K562细胞共培养,观察Mr35 000 GZB能否进入K562细胞;观察活化后NK92细胞的死亡率,并检测其分泌Mr35 000 GZB的酶活性.结果 NK92细胞PMA/ION刺激4h后,在SL外的胞质中生成大量GZB,Mr为35 000区别于SL内GZB的Mr32 000.经免疫电镜和免疫荧光染色进一步显示,这些GZB位于溶酶体外的小囊泡内.同时,Mr35 000 GZB能被分泌至细胞外.进一步检测发现受到刺激的NK92细胞在SL外的胞质中同时出现GZB/丝氨酸蛋白酶抑制剂9(serpinb9)复合物以及Mr35 000 GZB,但死亡率未上升,与之相应的是SL内的GZB具有酶活性,SL外的Mr35 000 GZB为酶原形式,表明Mr35 000 GZB并非由SL漏出.结论 人NK细胞内存在SL外无酶活性的Mr 35 000 GZB,以非溶酶体途径快速生成方式分泌至细胞外,提供了部分细胞外的GZB.
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