期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体库构建及筛选
杨光勇；郭海涛；刘茜明；何光志；田维毅；蔡琨；王平；王文佳
关键词：重组人白细胞介素4(rhIL-4R), 噬菌体展示技术, 单链抗体
摘要：目的 应用噬菌体展示技术构建重组白细胞介素4受体(IL-4R)噬菌体单链抗体(scFv)库,并从抗体库中进行筛选.方法 利用重组人IL-4R(rhIL-4R)蛋白免疫BALB/c小鼠,提取总RNA,反转录PCR扩增VH和VL基因,经重叠延伸PCR扩增出带有限制性酶切位点的scFv,用限制性内切酶SfiⅠ和NotⅠ分别双酶切scFv和pCANTAB5E载体,利用T4连接酶进行连接,转入感受态细菌E.coli TG1中制备转化子;在培养基中培养得到噬菌体单链抗体库;通过3轮富集和筛选,选择抗原亲和力强的克隆进行测序分析.结果 经过3轮筛选,构建了库容为2×108的rhIL-4R单链抗体库,测序结果显示抗rhIL-4R蛋白scFv基因全长741 bp,编码247个氨基酸.通过VBASE2数据库分析,抗rhIL-4R蛋白的VH和VL基因序列都存在3个互补决定区和4个骨架区.结论 成功构建了抗rhIL-4R蛋白噬菌体scFv库.
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