期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
硒蛋白PP1(SEPP1)过表达抑制786-0和769-P人肾癌细胞增殖并引起G2/M期阻滞
刘侃；赵超飞；陈建文；巫胜攀；姚远新；武翀；罗国雄；张旭
关键词：硒蛋白PP1(SEPP1), 重组慢病毒载体, 肾透明细胞癌, 肿瘤增殖
摘要：目的 构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响.方法 以HEK293T细胞的cDNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体pLV-EGFP (2A) Puro质粒相连接,获得重组pLV-EGFP(2A) Puro-SEPP1载体并进行基因测序验证.将重组慢病毒载体与包装质粒共同转染HEK293T细胞,进行病毒包装.用病毒上清感染786-O和769-P细胞,采用Western blot法检测SEPP1蛋白表达.按照重组慢病毒感染细胞、空载体感染细胞、未感染细胞进行分组,通过MTS法检测细胞增殖活性、细胞平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞术检测细胞周期.结果 酶切后凝胶电泳得到与SEPP1的DNA大小相一致的片段与空载体片段,基因测序的结果与SEPP1序列完全一致.经pLV-EGFP (2A) Puro-SEPP1感染的786-O、769-P细胞在感染48h后,荧光显微镜下可见EGFP明显表达,实验组与空载体组、空白对照组相比较,SEPP1蛋白表达水平均明显提高.pLV-EGFP(2A) Puro-SEPP1感染组的细胞增殖能力降低,SEPP1过表达细胞集落形成能力明显降低,SEPP1过表达引起肾癌细胞G2/M期阻滞.结论 在786-O和769-P细胞过表达SEPP1显著降低细胞增殖能力,并在786-O细胞中引起G2/M期阻滞.
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