期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人源性抗前列腺特异性膜抗原单链抗体的表达及活性鉴定
韩东晖；吴介恒；欧阳清；魏铭；席文锦；杨安钢；温伟红；秦卫军
关键词：前列腺特异性膜抗原(PSMA), 单链抗体, 原核表达, 前列腺癌
摘要：目的 构建人源性抗前列腺特异性膜抗原(PSMA)单链抗体(scFv)的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化后,对其生物学活性进行鉴定.方法 将人源性抗PSMA scFv的基因克隆入原核表达载体pET302,将其转化入大肠杆菌BL21后用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,摸索不同诱导条件使scFv呈可溶性表达,经SDS-PAGE和Western blot法确认表达后,利用Ni2+-NTA亲和层析柱纯化目的蛋白.利用流式细胞术检测scFv与PSMA阳性和阴性细胞的结合情况.结果 成功构建人源性抗PSMA scFv的原核表达载体;在30℃、IPTG终浓度为0.05 mmol/L时,可实现目的蛋白的可溶性表达;经Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后获得纯度较高的抗PSMA scFv蛋白;流式细胞术结果显示该scFv可与PSMA阳性的LNCaP前列腺癌细胞特异性结合,而不与PSMA阴性的PC-3细胞结合.结论 在大肠杆菌成功表达了可溶性人源性抗PSMA scFv,获得的抗PSMA scFv能够特异性地与PSMA阳性前列腺癌细胞结合.
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