期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
脆性X精神发育迟缓基因1(FMR1)真核表达载体的构建及其应用
杨文静；富显果；廖娟；郭小艳；兰风华
关键词：脆性X精神发育迟缓基因1(FMR1), 真核表达, Hela细胞, 免疫荧光技术
摘要：目的 构建人脆性X精神发育迟缓基因1(FMR1)真核表达载体,建立稳定转染FMR1的HeLa细胞系.方法 采用PCR扩增出人FMR1的cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入pEGFP-N2真核表达载体中,并对重组质粒进行双酶切及DNA测序鉴定.用脂质体将验证的重组质粒转染至HeLa细胞,通过G418筛选建立FMR1稳定转染的HeLa细胞系.进一步运用Western blot法、免疫荧光染色结合激光扫描共聚焦显微镜技术鉴定FMR蛋白(FMRP)在HeLa细胞中的表达及定位.结果 双酶切和DNA测序结果表明pEGFP-N2-FMR1真核表达质粒构建成功.Western blot和激光共聚焦显微镜结果显示GFP-FMRP融合蛋白在HeLa细胞中成功表达且主要定位在细胞质.结论 成功建立FMR1稳定转染的HeLa细胞系并可以表达FMRP.
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