期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
鸡白痢沙门菌SpiC蛋白的原核表达及其应用
耿士忠；刘欢；焦新安；潘志明；钱珊珊；郭荣显；安树敏；薛颖
关键词：鸡白痢沙门菌, 来杭鸡, spiC基因, 原核表达, 间接ELISA
摘要：目的 进行鸡白痢沙门菌SpiC蛋白原核表达并建立以SpiC蛋白为检测抗原的间接ELISA.方法 以鸡白痢沙门菌S06004基因组DNA为模板,PCR扩增384 bp的spiC基因.将spiC基因克隆至原核表达载体pET30a中,构建重组原核表达质粒pET30a-spiC,再转化到表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定,纯化His-SpiC蛋白,建立SpiC蛋白为检测抗原的间接ELISA并检测临床血清样品.结果 通过对诱导后重组菌裂解产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,重组菌可以表达相对分子质量(Mr)约19 200的可溶性重组蛋白His-SpiC.重组蛋白GST-SpiC免疫无特定病原体鸡,所获得的高免血清能识别重组蛋白His-SpiC,表明体外表达的重组蛋白His-SpiC有良好的免疫反应原性.所建立的以重组蛋白His-SpiC介导的间接ELISA有较好的特异性,能够区分spiC基因缺失型疫苗候选株免疫与野生菌自然感染.结论 重组蛋白His-SpiC呈可溶性表达,具有良好的免疫原性,以重组蛋白His-SpiC建立的间接ELISA,可以作为区分感染和免疫动物(DIVA)鸡白痢疫苗免疫的鉴定方法.
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