期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
结核分枝杆菌抗毒素higA的原核表达及多克隆抗体制备
刘丹；伊正君；付玉荣；李书轻；杨珊珊
关键词：结核分枝杆菌, 毒素抗毒素系统, higA, 多克隆抗体
摘要：目的 克隆编码结核分枝杆菌抗毒素基因higA并在大肠杆菌中表达,纯化higA蛋白后,制备兔抗higA的多克隆抗体.方法 利用PCR法从结核分枝杆菌H37Rv基因组扩增higA基因;构建重组表达质粒pET-32a(+)-higA;筛选出阳性重组质粒后,转化大肠杆菌BL21,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导目的蛋白表达;利用SDS-PAGE与Western blot法鉴定目的蛋白的表达;以纯化的higA蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗higA的多克隆抗体并进行效价及特异性鉴定.结果 成功扩增出了higA基因,克隆于载体pET-32a(+)质粒中,PCR筛选和酶切鉴定获得阳性克隆,测序证实正确;转化大肠杆菌BL21后能成功诱导higA蛋白[相对分子质量(Mr)36 630]的表达;利用纯化的higA蛋白免疫新西兰大白兔后,能有效地刺激特异性higA抗体的产生,抗体的效价达到1∶3200以上.结论 成功在大肠杆菌中表达出higA蛋白,并制备出效价及特异性良好的兔抗higA多克隆抗体.
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