期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
慢病毒介导的shRNA敲低FHL1的表达促进HeLa和HepG2细胞生长
范忠义；徐小洁；张晓梅；王涛；韩白玉；梁迎春；叶棋浓；焦顺昌
关键词：FHL1基因, 小发夹RNA, 细胞生长
摘要：目的 通过构建靶向四个半LIM结构域蛋白1(FiHL1)基因的慢病毒介导的短发夹RNA (shRNA),观察FHL1表达降低对HeLa细胞和HepG2细胞生长的影响.方法 构建FHL1基因的shRNA干扰病毒载体,将重组质粒转染人胚肾293T细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测转染pLenti-H1 FHL1 shRNA对FHL1表达的抑制效果.慢病毒感染官颈癌HeLa细胞和HepG2肝癌细胞,经2～3周嘌呤霉素筛选后得到FHL1稳定低表达的细胞,利用生长曲线实验和克隆形成实验检测FHL1基因表达降低后对细胞生长的影响,利用软琼脂实验检测对肿瘤细胞非锚定依赖性生长的影响.结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,构建的shRNA病毒载体能够明显抑制FHL1的表达;生长曲线实验和克隆形成实验显示,慢病毒介导的FHL1 shRNA能够明显促进肿瘤细胞的生长;软琼脂实验结果表明,FHL1低表达能够促进肿瘤细胞的非锚定依赖性生长.结论 构建的pLenti-H1 FHL1 shRNA慢病毒载体可有效地抑制FHL1表达,明显促进HeLa细胞和HepG2细胞的增殖.
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