期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2015年第12期

抗IL-4全人源单链抗体的筛选和鉴定

曹新梅;年四季;叶迎春;王栩;袁青

关键词:白细胞介素4(IL-4), 全人源单链抗体, 筛选, 鉴定
摘要:目的 表达人白细胞介素4(IL-4),从全人源单链抗体(scFv)文库中筛选抗IL-4全人源scFv并鉴定其特异性.方法 采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导pET102/IL-4/BL21表达IL-4,进行纯化鉴定.利用全人源噬菌体抗体文库表达抗IL-4全人源scFv,用表达的IL-4作为抗原,筛选阳性克隆菌株经PCR、酶切及测序鉴定.采用斑点杂交检测抗IL-4scFv的特异性.结果 表达的IL-4融合蛋白相对分子质量(Mr)为27 000.采用该抗原筛选出了表达抗IL-4的阳性克隆,PCR结果显示,在约1000bp处有扩增的目的条带.酶切结果显示,有2株克隆的指纹图谱相同,其余均不同.选取指纹图谱不同的且与IL-4结合能力强的4个scFv的克隆进行测序,显示有3个的序列正确.斑点杂交显示,这3株克隆表达的scFv均具有特异性.结论 成功筛选到抗IL-4全人源scFv.