期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
锌依赖的金属蛋白酶1促进巨噬细胞凋亡
李鹏；何永林；张继明；方陈城
关键词：卡介苗, 锌依赖的金属蛋白酶1(Zmp1), 真核表达, RAW264.7细胞, 细胞凋亡
摘要：目的 构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响.方法 以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒pEGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒pEGFP-N1-zmp1并转染RAW264.7细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测zmp1 mRNA的水平;藻红蛋白标记的膜联素V/7-氨基放线菌素D(annexinV-PFE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测Zmp1蛋白对细胞凋亡影响.结果 扩增出zmp1基因;真核表达质粒经过XhoⅠ和BamH Ⅰ双酶切及基因测序鉴定构建成功;转染细胞24h后,经荧光倒置显微镜观察到绿色荧光;qRT-PCR结果显示转染pEGFP-N1-zmp1的RAW264.7细胞zmp1 mRNA的表达显著升高;转染后48 h,细胞早期凋亡率有所增加.结论 在RAW264.7细胞中成功表达了Zmp1并能促进巨噬细胞凋亡.
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