期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
慢病毒介导的shRNA对A549细胞Pin1表达的干扰作用
赵帅；董文斌；张婵；李清平；康兰；雷小平；郭琳；翟雪松
关键词：肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1), 慢病毒载体, A549细胞, 基因表达
摘要：目的 构建Pin shRNA慢病毒载体,建立稳定抑制肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)表达的A549细胞系.方法 根据查阅文献获得Pin1 shRNA干扰靶点序列并插入pLenR-GPH载体,构建pLenR-GPH-Pin1 shRNA慢病毒载体,随后转入人胚肾HEK293T细胞中,收集其上清进行病毒滴度测定,再行慢病毒的包装,将获得的慢病毒毒液感染A549细胞.通过实时定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测Pin1在不同组的表达抑制情况.结果 经限制性内切酶鉴定及测序分析,成功构建了pLenR-GPH-Pin1 shRNA慢病毒载体质粒,包装并得到高滴度的病毒颗粒.通过qRT-PCR和Western blot法检测显示,与对照组相比,pLenR-GPH-Pin1shRNA慢病毒载体感染的A549细胞中Pin1的表达在mRNA和蛋白水平均有所下降.结论 慢病毒介导的shRNA能够有效下调A549细胞中Pin 1的表达.
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