期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定及其在人宫颈癌细胞系HeLa中的表达
林晓亮；姜云波；赵倩；殷小涛；田仁礼；李云奇；徐元基；阎瑾琦；张巍
关键词：p53调节的凋亡诱导蛋白1, 腺病毒载体, Hela细胞, 基因治疗
摘要：目的 构建携带外源性p53调节的凋亡诱导蛋白1 (p53AIP1)基因重组复制缺陷型腺病毒载体,观察其在HeLa细胞中的表达.方法 设计针对p53AIP1基因序列并插入特定酶切位点的特异引物,通过PCR扩增p53AIP1基因序列,利用DNA重组技术将p53AIP1基因定向插入到腺病毒穿梭载体pDC316,构建穿梭质粒pDC316-p53AIP1；在LipofectamineTM 2000介导下穿梭载体pDC316-p53AIP1和腺病毒骨架载体pBHGlox△E1,3Cre共转染进HEK293细胞；通过Cre-loxP重组酶系统,使Shuttle质粒和辅助大质粒发生定点重组从而包装产生携带目的基因p53AIP1的复制缺陷型重组腺病毒(Ad-p53AIP1).将Ad-p53AIP1和Ad-null按MOI=100感染HeLa细胞,应用Western blot法检测蛋白水平的表达.结果 基因片段成功连入pDC316载体上,对所构建新载体分别行PCR扩增、酶切、测序鉴定,与预计一致.Western blot法检测证实,Ad-p53AIP1感染HeLa细胞后蛋白有表达.结论 成功构建携带p53AIP1基因的重组复制缺陷型腺病毒载体,并且有较强的感染能力.
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