期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
铅诱导血脑屏障体外模型中紧密连接相关蛋白的信号调控
徐焰；车红磊；刘明朝；柯涛；马越云；陈景元；郝晓柯
关键词：铅, 血脑屏障, 血脑屏障体外模型, 紧密连接, 信号转导通路
摘要：目的 研究铅损伤体外血脑屏障(BBB)模型的紧密连接过程中,MAPK、AKT通路的改变,并观察相关通路的抑制剂的调节作用.方法 利用TranswellTM小室培养系统将ECV304人脐静脉内皮细胞系与C6大鼠胶质瘤细胞共培养建立体外BBB模型.共培养实验组按照加入醋酸铅(PbC4 H6 O4)浓度的不同分组.测量跨内皮阻抗(TEER)和FITC-葡聚糖通过量,以动态TEER峰值和FITC-葡聚糖通过量作为判断ECV304细胞紧密连接形成的标准.Western blot法检测铅暴露对细胞紧密连接相关蛋白表达的影响；利用免疫荧光细胞化学染色检测紧密连接相关蛋白的细胞定位；染铅细胞MAPK、PI3K/AKT通路抑制作用.结果 铅对ECV304细胞的生长具有抑制作用,且具有时间依赖性和剂量依赖性(P＜0.05)；随着培养时间延长,TEER的测定值不断下降,而FITC-葡聚糖通过量显著上升(P＜0.05)；Western blot法检测发现,在2.5 μmol/L铅作用条件下,ECV304细胞和C6细胞共培养体系中ECV304细胞中的紧密连接相关蛋白ZO-1、occludin和claudin-5的表达水平逐渐下降；p38、ERK、AKT的磷酸化水平逐渐增强；采用免疫荧光细胞化学染色发现ECV304细胞紧密连接相关蛋白表达减弱,信号通路抑制剂抑制铅诱导的信号通路活化,ERK1/2抑制剂PD98059和PI3K抑制剂LY2940021可抑制铅诱导的紧密连接相关蛋白表达降低.结论 铅可诱导BBB通透性增强,MAPK、AKT通路抑制剂可抑制BBB通透性.
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