期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人CD3ξRNAi逆转录病毒载体的构建及鉴定
高美华；王娟；张蓓；王冰；解西河
关键词：shRNA, CD3ξ, CD59, PA317, 逆转录病毒载体
摘要：目的:利用RNAi表达载体法构建并筛选携带针对CD3ξ基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆.方法:利用.DNA重组技术,设计3条60bp能转录产生靶向CD3ξ小发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,以pSUPER.retro.neo+ gfp质粒作为空载体经限制性核酸内切酶酶切后与RNAi序列进行重组,构建CD3ξ-pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体,脂质体法转染包装细胞系PA317,建立产生逆转录病毒的细胞克隆.结果:重组载体经限制性核酸内切酶酶切、PCR和测序鉴定表明CD3ξ-pSUPER retroRNAi 重组质粒构建成功；脂质体法将重组载体转染包装细胞系PA317,表达绿色荧光蛋白,表明包装成功.结论:成功地构建了特异性沉默CD3ξ基因的pSUPER retroRNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞系,为后续研究CD59与CD3ξ在T细胞内信号转导的相互作用提供理论和实验依据.
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