期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
P2Y6稳定干扰乳腺癌细胞系的建立及其增殖能力评价
杨林立；李瑞梅；潘新华；钱旻；杜冰
关键词：P2Y6, shRNA, 慢病毒, 增殖, 乳腺癌细胞
摘要：目的:应用shRNA技术,构建P2Y6基因稳定干扰的乳腺癌细胞株,为P2Y6调控乳腺癌发生发展的功能及机制研究奠定基础.方法:以人P2Y6基因为靶序列,设计并合成干扰序列,并将其插入经EcoRI和AgeI酶切的PLKO线性化质粒.阳性克隆经EcoR Ⅰ和NdeⅠ酶切、测序正确后与ps-PAX2、pMD2.G和PLKO重组慢病毒载体共转染293T细胞,包装成完整病毒.病毒经富集后感染乳腺癌细胞BT549,经嘌呤霉素筛选P2Y6稳定干扰的乳腺癌细胞.通过RT-PCR、Western blot等方法检测P2Y6的干扰效率.后通过MTS实验对P2Y6基因稳定干扰后乳腺癌细胞的增殖能力进行评价.结果:阳性克隆经DNA测序后与预期相符.稳定转染P2Y6shRNA的BT549细胞中P2Y6的mRNA和蛋白表达水平与对照组细胞相比明显下降.P2Y6基因干扰后乳腺癌细胞的增殖能力没有显著变化.结论:成功构建人P2Y6基因表达稳定干扰的乳腺癌细胞株BT549.P2Y6的表达与乳腺癌细胞增殖无明显相关性.
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