期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
分泌型小鼠IL-1β表达载体促进Hepa1-6肝癌细胞的增殖和迁移
田叶；林志娟；孙萍；刘艳菲；鞠吉雨；梁淑娟
关键词：IL-1β, 肝癌细胞, 信号肽, 经典分泌途径, 迁移
摘要：目的:构建小鼠经典途径分泌型IL-1β真核表达载体,转染Hepal-6细胞后,检测胞质及上清中IL-1β分泌表达水平,并考察其对肝癌细胞体外增殖活性、迁移能力的影响.方法:利用特异性上下游引物将小鼠AFP信号肽序列和小鼠IL-1β成熟蛋白编码基因进行拼接后,再与pLIVETM载体进行连接,DNA测序鉴定阳性克隆；jetPEI法将重组载体、pLIVETM空载体、pLIVE -lacZ转染小鼠肝癌细胞株Hepal-6后,经β-gal染色监测转染效率；各转染组经LPS及monesin 处理后双抗体夹心ELISA法分析细胞培养上清及细胞裂解液中IL-1β的表达水平；通过MTT方法分析经典途径分泌型IL-1β对细胞体外增殖活性的影响.结果:成功构建出了小鼠分泌型IL-1β真核重组表达载体pLIVE-smIL-1 β；β-gal染色后,显示外源基因在3d左右时转染效率高；双抗体夹心ELISA法表明转染后与Hepal-6/mock组细胞相比,Hepal-6/smIL-1β组细胞胞质和上清中IL-1β的表达明显增高；MTT及细胞迁移实验分析证实,转染Hepal-6/smIL-1β组细胞体外增殖速度明显加快.结论:该表达载体可以通过经典途径分泌促炎性因子IL-1β且高效表达成熟肽IL-1β,并能够显著促进肿瘤细胞的体外增殖和迁移能力.
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