期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
环氧合酶2mRNA3'UTR荧光素酶报告基因载体的构建
王黎；杨国栋；傅海燕；卢晓昭；韦梦影；卢兹凡
关键词：环氧合酶2, 3’非翻译区, 双荧光素酶报告系统, 转录后调控
摘要：目的:通过构建环氧合酶2( COX2)mRNA 3'UTR的全长及其截短体荧光素酶报告基因载体,为研究COX2基因在炎症条件下的的转录后调控提供有效的工具.方法:通过从胃癌细胞SGC-7901提取RNA,反转录成cDNA后,以此为模板,PCR扩增COX23’非翻译区(3’-UTR)全长及截短的序列,并将该序列连接到荧光素酶报告基因载体pGL3-control,构建pGL3-COX2 3'UTR全长及pGL3 -COX23' UTR不同截短体.测序后将上述载体分别与pRL-TK载体共转染293-T细胞,48 h后裂解细胞检测荧光素酶的活性.后通过ELISA检测在IL-1β的刺激下COX2的下游产物PGE2的表达,并再次测定pGL3-COX2 3' UTR全长的荧光素酶活性.结果:成功构建了pGL3-COX2 3'UTR全长及pGL3 -COX23’UTR不同截短体,荧光素酶报告系统表明COX2 3 'UTR对基因表达具有较强的调控作用.而在炎症因子IL-1β的刺激下,pGL3-COX2 3'UTR全长荧光素酶的活性明显升高.结论:成功构建了COX2 mRNA 3’UTR荧光素酶报告基因载体并证明在IL-13的刺激下COX2表达上调,参与转录后调控.
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