期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人源性噬菌体抗体库的构建及抗amylin抗体的初步筛选
公倩；李常颖；畅继武；朱铁虹
关键词：噬菌体抗体库, 胰淀素, 人源性单克隆抗体
摘要：目的:构建人源性噬菌体抗体库,从中筛选胰淀素(amylin)单克隆抗体(mAb),测定其特异性及抗原结合活性.方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PcR方法扩增人免疫球蛋白Fd段和轻链基因,构建噬菌体抗体库.酶切和PcR鉴定后,阳性克隆进行DNA测序分析.用人amylin抗原对抗体库进行筛选富集,将得到的阳性克隆进行Phage-ELISA鉴定,结果进行统计学分析.结果:终构建的抗体库库容约为0.8×108,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率为70％.阳性克隆进行DNA测序证实所获基因为人免疫球蛋白可变区基因.以amylin抗原进行3轮筛选,抗体库得到特异性富集.阳性克隆进行Phage-ELISA检测证实有良好的抗胰淀素抗原的特异性.结论:成功构建了一个人源性噬菌体抗体库,为从中获得人源抗amylin的mAb奠定了实验基础.
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