期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2012年第08期

人BRDT-NY多克隆抗体的制备及其在消化道肿瘤中的表达检测

丁卫民;杨丽;郑英;孙红亚;梁虹;王建军

关键词:人BRDT-NY, 多克隆抗体, 消化道肿瘤
摘要:[目的]构建人BRDT-NY原核表达载体,表达人BRDT-NY原核蛋白,制备其多克隆抗体,检测其在消化道肿瘤中的表达.[方法]以质粒pTriplEx2-BRDT-NY为模板,用PCR法扩增人的BRDT-NY基因.将其克隆到原核表达质粒pET28a+中,构建重组质粒pET28a +-BRDT-NY.将该重组质粒转化BL21菌,以IPTG诱导原核蛋白的表达.应用纯化的原核蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,ELISA测定滴度,并用免疫组织化学法分析该蛋白在消化道肿瘤组织中的表达.[结果]成功构建了用于原核蛋白表达的重组质粒,在BL21菌中表达BRDT-NY重组蛋白,用亲和层析Ni柱进行纯化得到人BRDT-NY蛋白.用纯化的BRDT-NY蛋白免疫小鼠2个月后,得到相应的多克隆血清抗体,经ELISA检测,滴度均能达到1/10万.免疫组织化学染色显示BRDT-NY蛋白在消化道肿瘤中有较高的表达率.[结论]该抗体的制备为进一步研究BRDT-NY在消化道肿瘤中的发病机制奠定了基础.