期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志

- 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号:1007-8738
- 国内刊号:61-1304/R
- 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
HPV-16E1蛋白的表达、纯化及其抗体制备
史茜;侯向前;郭景霞;朱慧;马正海
关键词:HPV-16, E1基因, 原核表达, 纯化, 抗体
摘要:目的:在原核细胞中表达、纯化人乳头状瘤病毒16型(HPV-16)E1蛋白并制备HPV-16 E1特异性抗体.方法:PCR扩增HPV-16 E1基因,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株.通过改变诱导温度与IPTG 浓度优化HPV-16 E1蛋白可溶性表达的条件,并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白.纯化蛋白经皮下及足垫免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot检测血清效价和特异性.结果:酶切和测序结果表明HPV-16 E1基因已克隆入pMAL-p2x.经优化筛选出HPV-16 E1融合蛋白诱导表达的佳条件为28℃,IPTG浓度0.5 mmol/L.经麦芽糖亲和层析法纯化获得了HPV-16 E1可溶蛋白,纯度达到95.7%.Western blot检测证明制备的抗血清能与HPV-16 E1蛋白特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1:640 000以上.结论:在大肠杆菌中表达并纯化获得了HPV-16 E1蛋白,该蛋白免疫新西兰白兔制备了高效价的HPV-16 E1蛋白抗血清,为HPV-16 E1功能研究提供了抗原和检测用抗体.
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