期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
小鼠几丁质酶的重组表达和抗体制备
高磊；蔡国平
关键词：几丁质酶, 脂多糖, 重组表达, 多克隆抗体
摘要：目的: 检测脂多糖(LPS)刺激成骨细胞后, 几丁质酶(chitotriosidase)基因表达变化情况.进行小鼠chitotriosidase的原核和真核表达, 并利用原核表达纯化的蛋白, 制备兔抗鼠多克隆抗体.方法: 用LPS刺激MC3T3-E1细胞, 提取mRNA, 通过RT-PCR获得小鼠chitotriosidase的编码区全长序列, 克隆进pRSET A载体, 转化BL21菌株, IPTG诱导表达.获得的包涵体蛋白用镍柱纯化后, 作为抗原免疫兔子, 制备多克隆抗体.用该抗体检测真核表达的小鼠chitotriosidase蛋白, 并确定抗体的灵敏度和特异性.结果: LPS明显刺激chitotriosidase表达.原核表达的包涵体蛋白经镍柱纯化后也能制备出效果较好的多克隆抗体.结论: 成功地克隆表达了小鼠的chitotriosidase蛋白, 并制备出高灵敏度、高特异性的多克隆抗体, 为进一步阐明chitotriosidase在病理条件下的表达变化和功能提供了一条途径.
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