期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人Cyclin E原核表达载体的构建及表达
李珊；潘全；李云龙；叶昕
关键词：cyclin E, 基因克隆, 原核表达
摘要：目的:构建人Cyclin E基因原核表达载体, 并在E.coli BL21中表达并纯化.方法:PCR扩增人Cyclin E基因片段, 并将其克隆到原核表达载体pET32a(+)中, 构建重组质粒pET32a(+)-Cyclin E.经限制性内切酶EcoR I 与Xho I双酶切鉴定及序列测定后, 转化E.coli BL21, 经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白.结果:获得全长约为1 200 bp的人的Cyclin E基因片段.以构建的重组质粒pET32a(+)-Cyclin E转化E.coli BL21后, 经IPTG诱导, 表达出相对分子质量(Mr)约60 000的融合蛋白.经SDS-PAGE、 Western blot分析显示, 诱导表达的蛋白为Cyclin E.结论:成功地构建了表达载体pET32a(+)-Cyclin E, 并表达出重组蛋白His-Cyclin E, 为进一步筛选在体内外能与Cyclin E和CDK2结合的新蛋白奠定了基础.
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