期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
牛IL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中的表达及其活性
田兆菊；郑玉姝；胡敬东；赵宏坤
关键词：BoIL-18成熟蛋白基因, 杆状病毒表达载体系统, 昆虫细胞, 生物学活性
摘要：目的:在杆状病毒表达载体中表达牛白细胞介素-18(bovine interleukine-18, BoIL-18)成熟蛋白基因, 并鉴定其生物学活性.方法:设计一对特异性引物, 将编码BoIL-18的成熟蛋白基因亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBac HTb上, 构建重组质粒repFastBac HTb-18, 转化至DH10Bac感受态细胞中得到重组Bacmid(Bacmid-BoIL18).在Cellfectin作用下, 将Bacmid-BoIL18转染昆虫细胞sf9获得重组杆状病毒, 然后将重组杆状病毒感染sf9, 感染后不同时间收获sf9细胞, 进行SDS-PAGE电泳, 分析表达情况; 用BoIL-18的原核表达产物作为抗原制备的兔多克隆抗体进行Western blot分析; 将纯化的表达产物对牛外周血单个核细胞(PBMC)进行细胞增殖试验, 对健康牛脾进行IFN-γ诱生试验, 初步分析表达产物的生物学活性.结果:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达, 经薄层凝胶扫描分析证实, 表达量占总蛋白的21.3%; Western blot分析证明, 在相对分子质量(Mr)约为26000处有一条特异性条带.生物学活性分析表明, 纯化的表达产物可明显增强淋巴细胞增殖, 促进IFN-γ的产生.结论:BoIL-18成熟蛋白基因在昆虫细胞中获得了表达, 表达产物具有良好的生物学活性.
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