期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段的构建和表达
葛彦；陈永井；瞿秋霞；张学光
关键词：单克隆抗体, CD154, FAB
摘要：目的: 通过基因工程技术构建和表达抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段.方法: 从分泌鼠抗人CD154单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株4F1中提取总RNA, 分别采用特异性引物扩增mAb VH 和VL的DNA编码区基因.同时, 从人脾脏细胞中克隆出免疫球蛋白恒定区基因.利用基因重组技术构建嵌合Fab共表达载体pTXB1-Fab, 利用大肠杆菌表达简单, 高效, 成本低廉的特点, 对重组Fab进行原核表达.利用SDS-PAGE电泳、Western blot、流式细胞术对表达产物进行鉴定.结果: NCBI数据库BLAST显示, 克隆的基因序列符合小鼠Ig可变区特征.表达质粒pTXB1-Fab构建正确, 在大肠杆菌中实现可溶性表达.表达的人-鼠嵌合抗体与亲本抗体具有相同的识别位点. 结论: 成功地克隆获得阻断型抗人CD154 mAb(4F1)的轻链、重链可变区基因, 成功构建pTXB1-Fab共表达载体, 在大肠杆菌中实现可溶性表达, 为人源化抗体的制备奠定了技术基础.
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