期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人FOXP3 cDNA的克隆及在原核细胞中的表达
王进；刘清泉；张野；徐哲；黄长形
关键词：FOXP3, cDNA, 克隆, 原核表达
摘要：目的:克隆人FOXP3 cDNA, 构建其原核表达载体, 在大肠杆菌中表达.方法:从新生儿脐带血获得FOXP3 mRNA, 用巢式RT-PCR技术扩增FOXP3 cDNA, 产物纯化后T-A克隆连接至pMD18-T载体, 构建其原核表达载体pRSET-A-FOXP3, 转化大肠杆菌BL-21(DE3)pLysS, IPTG诱导, 表达产物经SDS-PAGE及Western blot检测和鉴定.结果:获得FOXP3 mRNA, 并对其编码区cDNA序列进行扩增.PCR产物连接至原核表达载体pRSET, 经DNA测序, 证实与GenBank中的人FOXP3编码序列一致.经SDS-PAGE及Western blot显示在相对分子质量(Mr)约为52 000处出现融合表达条带, 表达量约占菌体蛋白总量的20%.结论:成功地克隆人FOXP3 cDNA, 构建了其原核表达载体, 并在大肠杆菌中得到有效表达.
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