期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2007年第07期

小鼠B7-H4基因克隆及真核表达载体的构建

徐军发;袁春雷;杨衡;赵坤;胡国艳;龚非力

关键词:B7-H4, 真核表达, 基因克隆, 载体构建
摘要:目的:克隆小鼠B7-H4(mB7-H4)基因cDNA全长, 构建表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-GFP和表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-Fc.方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB7-H4 cDNA, 将其全长cDNA去掉中止密码克隆入真核表达载体pEGFP-N1中, 并转染293T细胞使其表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白;将其胞外功能区cDNA克隆入pcDNA3.1-hFc真核表达载体中, 并转染COS-7细胞使其表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白.结果:序列测定证实克隆的mB7-H4全长cDNA 阅读框正确完整,酶切和序列测定证实mB7-H4分别正确插入pEGFP-N1和pcDNA3.1-hFc载体中, 两种表达载体分别转染293T细胞和COS-7细胞后可分别表达跨膜型mB7-H4-GFP和可溶性mB7-H4-Fc.结论:成功地克隆mB7-H4基因并构建了两个真核表达载体, 它们可分别表达跨膜型和可溶性融合蛋白.