期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2007年第08期

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

王胜军;马洁;马斌;毛朝明;仝佳;杨敏;邵启祥;许化溪

关键词:FOXP3, 腺相关病毒, 免疫调节
摘要:目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒, 并检测其在NIH3T3细胞的表达情况.方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接, 构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒, 通过磷酸钙沉淀法共转染HEK 293细胞, 收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒, 并对病毒纯度和滴度进行鉴定.利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞, 体外观察感染效率和目的基因转录情况.结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3, 实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012 vg/mL, 体外感染NIH3T3细胞, 流式细胞术测定感染效率可达92.88%, 实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3 mRNA.结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV, 并可有效感染NIH3T3细胞, 为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具.