期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
F10蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备
付欣；邹东霆；周问渠；邢福祺；李冰
关键词：F10基因, 原核表达, 抗体
摘要：目的:表达F10蛋白,并制备兔抗F10多克隆抗体.方法:利用PCR方法扩增F10基因片段,经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切后连接入pET-GST原核表达载体,构建的pET-GST/F10融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化.表达产物用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定.以纯化的F10蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗F10的多克隆抗体,并以ELISA法检测抗体效价.结果:经酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的F10读码框.SDS-PAGE电泳分析显示pET-GST/F10诱导后表达一相对分子质量(Mr)约为61 000的融合蛋白,与预期结果相符.目的蛋白纯化后的纯度达90%以上,Western blot证实该蛋白是GST/F10的融合蛋白.将纯化的GST/F10融合蛋白免疫家兔,得到的兔抗F10抗体效价达1:20 000.结论:成功构建了人F10基因原核表达载体,并获得了高纯度的F10重组蛋白及兔抗F10抗体,为下一步研究F10基因功能奠定了实验基础.
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