期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2007年第12期

重组杆状病毒Bacmid-HER2胞外段基因的构建及鉴定

陈亚静;魏映辉;吴秀丽;王莉;王丽颖;于永利

关键词:HER2ECD, 基因克隆, 昆虫杆状病毒表达系统
摘要:目的:克隆人表皮生长因子受体2胞外段基因(HER2-ECD)的cDNA,构建重组杆状病毒Bacmid-HER2-ECD.方法:从Her2高表达的人乳腺癌细胞系SK-BR-3中提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HER2ECD基因cDNA.利用T/A克隆连接法,首先构建pMD18-T-HER2-ECD重组质粒,并对基因进行测序.然后通过酶切连接构建供体质粒pFastBac-HER2-ECD.将供体质粒转化入DH10Bac菌与空Bacmid发生转座,得到重组Bacmid-HER2ECD.对重组Bacmid进行PCR法和点杂交鉴定.结果:pMD18-T-HER2ECD内插入片段序列与实际序列一致;pFastBac-HER2ECD经酶切鉴定与预期结果一致.重组Bacmid-HER2ECD通过PCR法能得到目的大小片段,并且能够与特异性探针发生结合.结论:成功地完成了HER2ECD基因的克隆和重组Bacmid-HER2ECD的构建.