期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2007年第12期

人源抗癌胚抗原单克隆抗体的获得与鉴定

赵刚;范健

关键词:噬菌体抗体库, 癌胚抗原, 人源性单克隆抗体
摘要:目的:获得抗癌胚抗原(CEA)的单克隆抗体(mAb).方法:采用特殊的5轮筛选法(逐轮降低抗原包被量,严格洗脱条件),以固相化的人源CEA抗原淘筛本室构建的人源特异性噬菌体抗体库.获得有特异结合活性的CEA噬菌体抗体,酶切鉴定插入的抗体基因.切去噬菌粒上衣壳蛋白gⅢ基因,构建表达载体,在大肠杆菌中可溶性表达抗CEA抗体Fab段,ELISA、Westem blot检测抗体免疫学活性,测序分析抗体基因.结果:筛选出4株与CEA抗原特异结合而与BSA、HBsAg无交叉结合反应的噬菌体抗体.切去gⅢ基因,在大肠杆菌中表达可溶性抗体Fab段,表达量在细菌培养液上清和细菌裂解液中无统计学意义.可溶性抗体与人CEA抗原有特异结合活性,与BSA、HBsAg无交叉结合反应.Western blot显示在略大于相对分子质量(Mr)45 000处有一明显条带,与Mr48000的Fab大小一致.DNA测序分析表明Fab段VH属于IgG VH3基因家族,VL属于Vk1基因家族.结论:抗CEA噬菌体抗体库的构建和人源抗CEA mAb的制备,为CEA阳性表达肿瘤的靶向治疗奠定基础.