期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人DcR3融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备
吴春风；马忠森；王秀丽；杨俊玲；杨洋；张越；图们乌力吉；乔俊华
关键词：DcR3, 原核表达, 蛋白质纯化, 多克隆抗体
摘要：目的:制备DcR3融合蛋白及其多克隆抗体,并鉴定其特异性.方法:将亚克隆构建的pET28a(+)/DcR3重组表达质粒转化人大肠杆菌(E.coli)BL21菌株,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析法纯化目的蛋白,SDS-PAGE及Western blot分析蛋白产物,将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对其进行纯化及鉴定.结果:pET28a(+)/DcR3重组表达质粒在E.coli中诱导表达相对分子质量(Mτ)为33 000的目的蛋白,表达量约占菌体蛋白总量的38%,纯化后的目的蛋白纯度达98%.Western blot显示纯化蛋白与抗DcR3单克隆抗体(mAb)具有良好的反应性.纯化后多克隆抗体效价达1.28×10-6.结论:DcR3蛋白在E.coli中得到高效表达,成功制备高纯度DcR3蛋白及高效价抗DcR3多克隆抗体,为研究DcR3在组织中的表达、分布,研制ELISA试剂盒以检测恶性肿瘤及自身免疫性疾病等患者血清DcR3表达水平提供实验基础.
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