期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
高活性的人白细胞介素-3突变体的构建与表达
邹晓燕；杨胜利；龚毅
关键词：人白细胞介素-3, K116V, K116W, 定点突变, 单溶液细胞增殖
摘要：目的: 在大肠杆菌中构建表达高活性的人白细胞介素-3(hIL-3)突变体.方法: 通过定点突变的方法构建hIL-3突变体K116V和 K116W的表达载体, 并实现hIL-3突变体在大肠杆菌中的表达.对所得包涵体蛋白依次溶解、纯化、透析复性.用Western blot检测hIL-3突变体的特异性.单溶液细胞增殖(MTS)测定hIL-3突变体的生物学活性.结果: hIL-3在大肠杆菌中高效表达, 表达量占菌体总蛋白的40%以上, 主要以包涵体的形式存在.将包涵体溶解在8 mol/L脲中, 经Ni-NTA-Sepharose柱纯化后纯度达90%以上.MTS法测定hIL-3突变体K116V的活性为野生型的5倍, K116W的生物学活性也有所增加.结论: 获得了高活性的hIL-3突变体K116V, 有望成为hIL-3的替代品, 也证明了hIL-3第116位的赖氨酸残基对于hIL-3的生物学活性很重要.
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