期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2006年第04期

人金属硫蛋白MT-2a的原核表达、纯化及其抗血清的制备

周敏;杨芳;贺智敏;刘孝荣;陈主初;孙麟;孙宇

关键词:金属硫蛋白, 原核表达, 融合蛋白, 抗血清
摘要:目的: 在大肠杆菌中表达人金属硫蛋白(MT)-2a与谷胱甘肽S-转移酶(GST)的融合蛋白,并制备兔抗MT-2a抗血清.方法: 人MT表达菌株BL21/GST-MT-2a经IPTG诱导、超声裂解及Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化后,以可溶性融合蛋白GST-MT-2a免疫新西兰大白兔,制备抗血清.用双向凝胶免疫扩散和ELISA检测抗血清的效价,用Western blot检测抗血清的特异性.结果: 经诱导表达及亲和层析纯化,每L菌液可获得可溶性融合蛋白GST-MT-2a 38 mg.以此融合蛋白免疫新西兰大白兔制备的抗血清,双向免疫扩散效价>1∶ 256,ELISA 效价>1×10-7.Western blot检测证明抗血清的特异性良好.结论: 人MT-2a在大肠杆菌中得到高效表达,以纯化的GST-MT-2a可溶性融合蛋白免疫家兔得到高效价、高特异性的抗血清,为进一步研究MT-2a蛋白的生物学功能提供了重要的制剂.