期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
兔抗人唾液酸转运蛋白抗体的制备及特性鉴定
孙其飞；高媛；刘细保；孙启鸿；王松灵
关键词：唾液酸转运蛋白, 融合蛋白, 原核表达, 抗体制备
摘要：目的: 制备兔抗人唾液酸转运蛋白(sialin)的抗体,并进行特性鉴定.方法: 应用RT-PCR从培养的人颌下腺细胞系HSG中扩增编码sialin N端1～38氨基酸的DNA序列,构建重组表达质粒pGEX-5X-1-sialin,测序鉴定后,转化大肠杆菌JM109,在0.1 mmol/L IPTG的诱导下表达GST-sialin融合蛋白.经SDS-PAGE鉴定后,利用GSTrap FFTM柱纯化融合蛋白,并以其免疫家兔制备抗人sialin抗体.用ELISA法测定兔抗sialin血清的效价;用Western blot及免疫细胞化学等方法鉴定抗血清的特异性.结果: 构建了重组表达质粒pGEX-5X-1-sialin;以其转化大肠杆菌在IPTG诱导下,获得以可溶性形式表达的GST-sialin融合蛋白;表达的GST-sialin经GSTrap FFTM柱纯化后,免疫家兔制备出抗sialin抗血清,ELISA法测定抗血清的效价为1∶ 32 000.Western blot鉴定表明,制备的抗sialin抗体可特异地识别HSG细胞中相对分子质量(Mr)约55 000的sialin蛋白.免疫细胞化学检测表明,sialin抗血清识别的抗原定位于HSG细胞的细胞质和胞核.结论: 成功地制备出兔抗人sialin抗血清,为进一步研究sialin在涎腺组织的功能奠定了基础.
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