期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
GFP mRNA在树突状细胞中的转染及其影响因素分析
仲飞；仲振宇；梁爽；李秀锦
关键词：树突状细胞, mRNA, GFP, 基因转染
摘要：目的: 探讨绿色荧光蛋白(GFP)mRNA在树突状细胞(DC)中的转染及其影响因素.方法: 选用gfp报告基因, 在体外利用含T7 RNA聚合酶的mMESSAGE RNA转录试剂盒, 合成含有帽子结构的GFP mRNA, 通过酵母多聚A聚合酶加尾, 制备结构完整的GFP mRNA.与此同时, 从人的外周血液中分离单核细胞, 并在体外经GM-CSF和IL- 4刺激分化为DC.通过转染试剂介导将合成的GFP mRNA转染到DC内并使其表达.采用流式细胞术检测其转染效率和表达水平.结果: 体外合成GFP mRNA, 经转染试剂介导, 实现了gfp基因在DC中的表达.不同的转染试剂、 mRNA用量和细胞密度对mRNA的转染效率有较大的影响.采用Transmessenger Transfection Kit转染试剂, 1 μg GFP mRNA在200 μL X-VIVO-15无血清培养基中的转染密度为2.5×109/L的DC, 可获得较好的转染效果(转染效率达27%以上).结论: 在适当的条件下, 通过mRNA转染DC可获得较高的转染效率.
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