期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
结核杆菌Hsp65与EGFP融合基因的构建及DC疫苗的制备
肖凌；魏雅稚；夏飞；刘胜武
关键词：结核杆菌, HSP65, 增强型绿色荧光蛋白, 树突状细胞
摘要：目的: 构建结核杆菌H37Rv株Hsp65与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合基因pEGHsp65, 并以其转染小鼠的树突状细胞(DC), 制备抗结核的DC疫苗.方法: 采用PCR技术, 从培养的结核杆菌H37Rv株中抽提Hsp65基因, 克隆到含有EGFP基因的质粒pEGFP-C1中, 构建pEGHsp65融合基因.以其转染Hela细胞, 在共聚焦激光扫描荧光显微镜下观测不同时间荧光表达的强弱, 并用RT-PCR检测Hsp65 mRNA的表达.以pEGHsp65融合基因转染小鼠骨髓细胞经GM-CSF和IL- 4诱导分化的DC, 用MTT比色法检测DC疫苗刺激未致敏脾细胞的增殖.结果: 用EcoRⅠ和Bgl Ⅱ双酶切鉴定证实, H37Rv株Hsp65 DNA已插入重组表达载体pEGFP-C1中.将融合基因转染入Hela细胞, 48 h转染率高; 用RT-PCR在mRNA水平上可检测到Hsp65 mRNA的表达.用MTT比色法检测表明, 融合基因转染的DC能激活并引起未致敏的脾细胞增殖.结论: 成功地构建pEGHsp65 融合基因和以其制备的DC疫苗, 为进一步观察其治疗结核病的效应奠定了基础.
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