期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
用于IDDM基因治疗的rAAV2-GAD-Ig的研制
王仁喜；王建安；宋伦；韩根成；沈倍奋；吴小兵；黎燕
关键词：谷氨酸脱羧酶(GAD), GAD-Ig, pSNAV-GAD-Ig, rAAV2-GAD-Ig, 特异性免疫耐受
摘要：目的: 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig[GAD-Ig融合基因是由小鼠GAD(glutamic acid decarboxylase)基因插入到小鼠IgG3重链(Ig)基因的N端而成的], 制备含GAD-Ig融合基因cDNA的重组缺陷型腺相关病毒-2(rAAV2-GAD-Ig), 并探讨rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导I型糖尿病(IDDM)动物模型-NOD(nonobese diabetic)小鼠产生特异性免疫耐受.方法: 从含GAD-Ig融合基因的中介载体BSSK(BSSK-GAD-Ig)中, 用PCR方法扩增目的基因片段, 并克隆入真核表达载体pSNAV 中, 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig.以脂质体法将pSNAV-GAD-Ig转染到rAAV2包装细胞BHK-21中, 产生rAAV2-GAD-Ig.采用RT-PCR、 Western blot和ELISA法, 检测rAAV2-GAD-Ig感染的BHK-21细胞中目的基因的表达.应用GAD抗原体外诱导特异性T细胞的二次应答, 来检测rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导NOD小鼠产生特异性免疫耐受.结果: GAD-Ig目的基因已整合到靶细胞的基因组中, 并能以分泌形式表达目的蛋白GAD-Ig.将rAAV2-GAD-Ig肌注后, NOD小鼠能产生特异性免疫耐受.结论: 获得了可用于NOD小鼠治疗研究的rAAV2-GAD-Ig.
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