期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
通过随机突变提高抗TNF-α单链抗体的亲和力
汪保安；陈晓穗；王欲晓；曲佳；周丽君；王琰
关键词：致错PCR, DNA重排, 亲和力
摘要：目的:提高抗TNFα单链抗体(scFv)的亲和力.方法: 应用错配PCR技术在抗TNF-α scFv基因中引入随机突变, 再通过DNA交换( shuffling)使引入的点突变进一步重排组合, 构建突变噬菌体抗体库.采用硫氰酸盐洗脱法对抗体库进行淘筛.挑选活性得到改良的克隆, 用斑点ELISA法及硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力的改善.结果: 对PCR错配的突变库筛选未得到亲和力明显改善的抗体变种, 经DNA交换进一步构建变种库后, 筛选获得1个亲和力提高的克隆, 其相对亲和指数为1.37 mol/L, 较亲本抗体的相对亲和指数0.48 mol/L有明显提高.结论: 通过错配PCR和DNA交换引入随机突变构建抗体库, 可有效地提高scFv的亲和力.
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