期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
候选hEra结合蛋白A19/GST的融合表达及其抗体的制备
李云峰；吴元明；陈苏民；陈南春；黄勇；张晓楠
关键词：人Era 蛋白, A19蛋白, 重组融合蛋白表达, 多克隆抗体
摘要：目的:在大肠杆菌中表达候选人Era结合蛋白A19/GST融合蛋白, 并制备兔抗A19抗体.方法: 利用人Era蛋白全长作为诱饵, 进行胎肝cDNA文库的酵母双杂交筛选.将得到的候选人Era结合蛋白A19的编码基因序列克隆入pACT2载体中, 构建pACT2-A19.用PCR扩增A19蛋白的编码基因序列, 克隆入融合表达载体pGEX-4T3中, 构建A19的表达菌, 并经IPTG诱导表达A19蛋白.用SDS-PAGE分析及薄层扫描检测目的蛋白的含量.用A19蛋白免疫家兔制备抗血清, 以Western blot鉴定抗体的特异性并检测抗体的效价.结果: 大肠杆菌中表达的A19蛋白占菌体总蛋白的30.2%.Western blot分析显示, 抗血清具有较高的特异性, 其效价约为1: 4 000.结论: 成功地获得了候选的人Era结合蛋白A19, 制备了兔抗A19抗血清, 为后续Era功能的研究奠定了基础.
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