期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
分泌型TAT蛋白转导结构域基因通用真核表达载体的构建及表达
王锦之；陈巨星；杨忠；周宇荀；马昱澍；魏东芝
关键词：TAT蛋白转导结构域, 载体构建, 增强性绿色荧光蛋白, Western blot
摘要：目的:构建一个全新的分泌型TAT蛋白转导结构域基因哺乳动物细胞融合表达载体并对融合蛋白的表达进行分析.方法: 依照编码TAT-PTD11肽及所引入的BamH I酶识别序列和增强性绿色荧光蛋白N端7个氨基酸的碱基序列合成了3条引物, 以egfp基因为模板通过依次3轮PCR扩增得到tat-egfp融合基因, 该基因片段以Sfi I和Hind Ⅲ双酶切后插入哺乳动物细胞表达载体pSectagA, 构建成重组载体pSecTAT-m-egfp, BamH I单酶切后该载体自连, 即得到可通用的真核表达载体pSecTAT-m, 重组质粒pSecTAT-m-egfp转染HEK293细胞, 融合蛋白的表达用Western blot分析.结果: 酶切及测序证实表达载体pSecTAT-m构建成功, Western blot表明TAT-EGFP融合蛋白在HEK293细胞中获得表达并分泌到细胞培养液中.结论: 成功地构建了分泌型TAT蛋白转导结构域基因的哺乳动物细胞融合表达载体, 为更充分发挥TAT蛋白转导结构域在蛋白质功能及疾病治疗研究中的应用打下了基础.
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