期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
昆虫抗冻蛋白DAFP的原核表达、纯化和抗血清制备
王芸；吕国栋；薛娜；张富春；马纪
关键词：昆虫, 抗冻蛋白, 原核表达, 抗血清, 蛋白印迹
摘要：目的: 制备昆虫抗冻蛋白DAFP特异性的鼠抗血清.方法: 根据GenBank已发表的Dendroides canadensis抗冻蛋白基因序列(gi: 2737939),人工合成加拿大拟步甲虫(Dendroides canadensis)的抗冻蛋白基因(dafp),并克隆到原核表达载体pGEX- 4T-1和pMAL-p2x中,在大肠杆菌中进行表达.表达的融合蛋白经Glutathione Sepharose 4B纯化后,免疫小鼠制备抗DAFP的抗血清,抗体的效价及特异性分别采用ELISA和Western blot 进行检测.结果: SDS-PAGE检测表明,人工合成的dafp基因在大肠杆菌中可表达相对分子质量(Mr)为38 000的可溶性融合蛋白.以该融合蛋白免疫小鼠所制备的抗体,其ELISA滴度为1∶ 5 000, Western blot证实BL21/pGEX- 4T-1-dafp菌和TB1/pMAL-p2x-dafp菌的表达产物可特异性地与该抗体结合.结论: 在大肠杆菌中成功地表达了DAFP的融合蛋白并制备出抗融合蛋白的鼠抗血清,为进一步研究DAFP的特性奠定了基础.
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