期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
人TIM-3在真核细胞的表达及稳定转染细胞株的建立
张胜桃；刘晓军；金霞；何培根；袭非力；杨东亮
关键词：Tim-3, 真核表达, 流式细胞术
摘要：目的:构建人TIM-3真核表达载体, 在真核细胞中表达人TIM-3, 建立稳定转染细胞株.方法:设计特异性引物, 利用PCR技术扩增出TIM-3全编码区基因片段, 插入到真核表达载体pIRES2EGFP中, 重组质粒pIRES2EGFP-hTIM-3用脂质体转染法转染哺乳动物细胞, 以流式细胞术(FCM)和Western blot分析蛋白质的的表达, 借助FCM和选择性培养基筛选建立稳定转染细胞株.结果:成功构建了pIRES2EGFP-hTIM-3真核表达载体, 转染哺乳动物细胞COS-7和CHO后, FCM和Western blot分析证实TIM-3高效表达于细胞膜表面, 建立了稳定转染的CHO细胞株.结论:成功构建了人TIM-3真核表达载体, TIM-3高效表达在转染的哺乳动物细胞表面, 并建立了稳定转染的细胞株.为进一步研究TIM-3及其配体的生物学功能以及制备和筛选抗人TIM-3 mAb提供了条件.
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