期刊简介

               本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办,为国内外公开发行的国家级科技期刊,属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。                

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  • 杂志名称:细胞与分子免疫学杂志
  • 主管单位:中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位:陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 国际刊号:1007-8738
  • 国内刊号:61-1304/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全军优秀编辑奖(96)期刊收录:CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
细胞与分子免疫学杂志2004年第01期

重组人淋巴毒素α缺失体的表达、纯化及鉴定

刘永全;李道锋;牛晓霞;刘金毅

关键词:rhLT-α, 表达, 纯化, 鉴定
摘要:目的:构建重组人淋巴毒素α缺失体(rhLT-αΔN27)的原核表达载体, 在大肠杆菌中进行表达, 建立纯化rhLT-αΔN27的工艺.方法:从Jurkat细胞中提取总RNA, 用RT-PCR扩增rhLT-αΔN27基因, 并插入原核表达载体pET-23b中, 转化大肠杆菌BL21(DE3), 用IPTG诱导rhLT-αΔN27表达.包涵体经洗涤和复性后, 用DEAE Sepharose FF和Phenyl-Sepharose FF纯化.结果:rhLT-αΔN27以包涵体的形式表达, 表达量占菌体总蛋白的30%以上.纯化后, rhLT-αΔN27的纯度达99%, 比活性高于8×107 U/mg.纯化样品的相对分子质量(Mr)、等电点, 以及N端序列等其他理化性质均同预计的结果相符.结论:构建了rhLT-αΔN27的表达载体, 并成功地在大肠杆菌中进行了表达, 建立了rhLT-αΔN27的纯化工艺.