期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
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首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
GFP基因转染对骨髓基质细胞体内向软骨细胞分化的示踪作用
周广东；王晓云；刘德莉；崔磊；刘伟；曹谊林
关键词：重组逆转录病毒载体, 绿色荧光蛋白, 骨髓基质细胞, 软骨形成
摘要：目的:实现绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)报告基因在骨髓基质细胞(BMSC)中的高效、稳定、持久表达, 直接示踪BMSC在关节软骨缺损内的分布及分化.方法:构建重组逆转录病毒表达载体RV-GFP, 通过PT67包装细胞克隆、G418筛选及扩增, 获得大量含GFP基因的假病毒液, 并直接转染BMSC.将含有GFP基因转染标记的BMSC与生物可降解材料复合后, 植入猪自体关节软骨缺损处, 7个月后共聚焦显微镜检测修复组织中GFP标记的BMSC的分布及分化. 结果:经双酶切鉴定证实重组逆转录病毒表达载体RV-GFP构建成功, 转染PT67细胞后可在荧光激发波长下, 发出明亮的绿色荧光, 转染率达20%～50%, 经G418筛选后可达100%.筛选、扩增后, PT67细胞的上清培养液可成功地转染BMSC, 筛选后能稳定、持久、高效表达GFP.将标记的BMSC植入关节软骨缺损7个月后, 修复组织仍能高效表达GFP, 激光共聚焦显微镜下显示, 多数新生软骨陷窝内有GFP标记的细胞. 结论:构建的重组逆转录病毒GFP载体, 能持久标记骨髓基质细胞, 用于细胞动态变化的研究及细胞转归的示踪, 该方法简便、灵敏、可靠、直观.标记的BMSC可在关节软骨缺损内分化为成熟的软骨细胞, 并在软骨缺损的修复中发挥重要作用.
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