期刊简介
本刊是由中国免疫学会和第四军医大学共同主办，为国内外公开发行的国家级科技期刊，属于全国中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科学引文数据库源期刊及美国《CA》刊源。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>细胞与分子免疫学杂志
- 杂志名称：细胞与分子免疫学杂志
- 主管单位：中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位：陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 国际刊号：1007-8738
- 国内刊号：61-1304/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全军优秀编辑奖（96）期刊收录：CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 国家图书馆馆藏
抗多囊蛋白1氨基端单克隆抗体的制备和鉴定
赵海丹；梅长林；李林；孙田美；张树忠；吴玉梅；宋吉
关键词：常染色体显性多囊肾病, 多囊蛋白1, 多拷贝区, 单克隆抗体
摘要：目的:用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白1胞外区氨基端的单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行鉴定.方法:以肾组织总RNA为模板,用RT-PCR扩增多囊蛋白1胞外区氨基端的编码基因PKD1 cDNA.将该基因克隆到融合蛋白表达载体pQE30中,转染大肠杆菌M15.以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达多囊蛋白1胞外区氨基端的组氨酸融合蛋白(PC1-e2),用亲和层析法纯化.以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株Sp2/0进行细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆,有限稀释法进行单克隆化.mAb的特异性用间接ELISA和Western blot鉴定.结果:克隆到两个编码多囊蛋白1氨基端的cDNA片段(502 bp和471 bp).构建的表达质粒经酶切和DNA测序证实,为所需要的质粒.表达出相对分子质量(Mr)分别为19 800和18 900的融合蛋白,经Western blot鉴定,均为多囊蛋白1的融合蛋白.用Mr为18 900的融合蛋白免疫小鼠,得到杂交瘤细胞株7B1.Western blot分析表明,该细胞株分泌的mAb能特异地与多囊蛋白1氨基端结合.结论:本实验表达了PKD1多拷贝区所编码的PC1-e2,成功地制备了抗多囊蛋白1胞外区N端的mAb.
友情链接